1. 預(yù)期用途

準(zhǔn)備 07/202 旨在用于標(biāo)準(zhǔn)化免疫測(cè)定以測(cè)量血清轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 (sTfR)。與其載體蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白 (Tf) 結(jié)合的鐵的細(xì)胞攝取是由轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 (TfR) [1-3] 介導(dǎo)。受體的截短、可溶形式存在于血清中 (sTfR) [4]，由蛋白酶作用形成。 sTfR 作為與轉(zhuǎn)鐵蛋白的復(fù)合物循環(huán)，轉(zhuǎn)鐵蛋白的摩爾濃度約為 sTfR 濃度的 250 倍。當(dāng)紅細(xì)胞生成增加和缺鐵時(shí)，TfR 密度上調(diào)。由于 sTfR 濃度與總 TfR 含量相關(guān)，因此升高的 sTfR 濃度是缺鐵的標(biāo)志。 WHO/CDC 聯(lián)合技術(shù)磋商會(huì)評(píng)估人群鐵狀況（日內(nèi)瓦，2004 年 4 月 6 日至 8 日）得出結(jié)論，血清鐵蛋白和血清轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 (sTfR) 的測(cè)量提供了估計(jì)人群鐵狀態(tài)的最佳方法 [5]。

2. 注意

NIBSC07/202可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(rsTfR)標(biāo)準(zhǔn) 不適用于人類或動(dòng)物人類食物鏈。

該制劑含有人類來(lái)源的材料，最終產(chǎn)品或從中提取的原材料都經(jīng)過(guò)測(cè)試，發(fā)現(xiàn) HBsAg、抗 HIV 和 HCV RNA 呈陰性。與所有生物來(lái)源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對(duì)健康有潛在危害。它應(yīng)該被使用和丟棄根據(jù)您自己實(shí)驗(yàn)室的安全程序。此類安全程序應(yīng)包括戴防護(hù)手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。應(yīng)注意在打開(kāi)安瓿或小瓶，以避免割傷。

3. 單元

21.7 mg/L 或 303 nmol/L（用 0.50 mL 蒸餾水或去離子水復(fù)溶時(shí)）。這些值適用于游離 rsTfR 單體。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國(guó)：英國(guó)。 rsTfR 由 Caltech 從編碼殘基 121-760（野生型 TfR 的 C 端氨基酸）的人 TfR 基因部分制備

（加利福尼亞州，美國(guó)）[6]。 rsTfR 的 N 端起始位點(diǎn)的選擇是基于對(duì)先前通過(guò)胰蛋白酶消化胎盤 TfR 產(chǎn)生的可溶性片段的研究[7]。與 sTfR 一樣，據(jù)報(bào)道，胰蛋白酶片段和 rsTfR 形成穩(wěn)定的二聚體，結(jié)合 2 個(gè)轉(zhuǎn)鐵蛋白分子 [6, 8]。 rsTfR 的質(zhì)譜顯示主峰為 78,336 Da。使用 MALDI-TOF 分析從 SDSPAGE 衍生的 rsTfR 點(diǎn)切割的肽證實(shí)了與來(lái)自已發(fā)表的 TfR 序列數(shù)據(jù)的等效理論肽的質(zhì)量同一性 [9, 10]。與未處理的 rsTfR 相比，在用 PNGase F 處理以去除 N 連接聚糖的 rsTfR 的 SDS-PAGE 上，顯示 rsTfR 通過(guò)大約 7,000 Da 的遷移率變化被糖基化。

rsTfR 的濃度由 A280nm 確定，并使用調(diào)整后的理論消光系數(shù)和根據(jù)其公布的序列計(jì)算的分子量 [6, 9, 10;分子量 = 71,725；消光系數(shù) = 93,790；因此，1 mg/mL 溶液的吸光度為 1.308]。 rsTfR 在轉(zhuǎn)鐵蛋白受體耗盡的人血清中稀釋至 21.74 mg/L，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)抗 HIV I 和 II、HBsAg 和抗 HCV 呈陰性（SCIPAC，Sittingbourne，Kent，UK；在Dade Behring 友好地進(jìn)行免疫測(cè)定中耗盡的血清），在 4oC （~0.5 mL/安瓿）下分配在玻璃安瓿中，并凍干。在 82 個(gè)安瓿中分配的溶液的平均重量為 0.5062 克。填充不精確度（CV）為0.24%，氧氣頂空為0.97%，殘留水分為0.54%。

5. 存儲(chǔ)

NIBSC07/202可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(rsTfR)標(biāo)準(zhǔn)  將未開(kāi)封的安瓿瓶存放在 -20oC 或以下。

請(qǐng)注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性，NIBSC 可能會(huì)在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。

6. 開(kāi)瓶指南

DIN 安瓿瓶有一個(gè)“易開(kāi)"顏色的壓力點(diǎn)，窄的安瓿桿在此與較寬的安瓿瓶主體相連。各種類型的安瓿破碎機(jī)可商購(gòu)。要打開(kāi)安瓿，輕輕敲擊安瓿以收集底部（標(biāo)記）端的材料，并按照安瓿破碎器隨附的制造商說(shuō)明進(jìn)行操作。

7. 材料的使用

在重新配制之前，不應(yīng)嘗試稱量?jī)龈刹牧系娜魏尾糠帧?/span>

用 0.50 mL 蒸餾水或去離子水重新配制安瓿中的物質(zhì)。重組材料應(yīng)用于標(biāo)準(zhǔn)化血清轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 (sTfR) 的測(cè)定。制劑 07/202 接受了一項(xiàng)涉及 6 個(gè)商業(yè)免疫測(cè)定試劑盒的國(guó)際合作研究，該研究表明，相對(duì)于 07/202，而不是針對(duì)試劑盒校準(zhǔn)品，測(cè)量三個(gè)血清樣品的 sTfR 含量顯著提高了不同測(cè)定方法之間的一致性。